大豆遗传转化（一）——种子消毒、萌发与菌液制备

分享优化后的氯气灭菌法，污染率＜1%，操作步骤包括种子准备、灭菌时间和去残留，确保种子消毒到位，避免后续实验失败。

✨ 关键步骤
准备工作：把种子放进一次性培养皿（开盖），干燥器里放两个 250ml 烧杯，各加 150ml 次氯酸钠 + 10ml 浓盐酸（沿壁倒，别溅到！），干燥器的盖子用凡士林封口
灭菌时间：16h 刚刚好（我们一般下午 4:30 开始，第二天早 9 点结束，通风橱彻夜通风更安全）
去残留：灭菌后立刻盖好培养皿，用 3M 透气胶带封好，放 4℃冰箱 / 超净台一周（急用时超净台吹风 1h 也能救场）

⚠️ 避坑指南
-浓盐酸别加太快！反应太剧烈可能溅出，安全第一
-凡士林一定要涂匀，漏气 = 白消毒
-残氯没去干净会抑制发芽，注意去除干净

种子消毒完，下一步就是 “种子萌发” 和 “菌液制备”—— 这俩必须同一天做，节奏卡对了，后续侵染效率直接拉满！

🌱 种子萌发：暗培养是关键
超净台里把灭菌种子摆到 G0 萌发培养基上（每皿放多少，看种子大小，别太挤）
暗培养 12-16h（刚好够第二天切外植体，时间短了发芽不够，长了下胚轴太细）
🔬 菌液制备：抗性 + 温度要盯紧
载体菌液涂在对应抗性的 YEP 固体平板上（比如卡那抗性就用含卡那的 YEP）
超净台里开盖吹 10min（让酒精挥发掉），3M 胶带封口后倒放 28℃烘箱过夜（别正放！冷凝水会滴下来污染菌落）

⏰ 时间轴参考
上午 9 点处理种子萌发→同时涂平板→下午 5 点检查平板是否密封好→次日一早刚好能用（完美衔接外植体制备）

💡 小技巧：菌液平板倒放时垫张滤纸，避免冷凝水影响菌体生长

💡 大家实验室常用哪种消毒方法？欢迎留言跟我沟通~ 关注我们，解锁后续转化步骤

关于我们