辣椒遗传转化（一）外植体制备

• 吉农基因辣椒转化服务

提供从载体构建到转基因/编辑植株交付的一站式服务
覆盖多种辣椒类型
阳性苗交付，结果稳定可靠

今天起跟大家分享辣椒转化流程，欢迎随时交流沟通，也可通过文末联系方式找到我们！

1⃣️培养基的配制与灭菌

按培养基配方和配制过程配制种子培养基和预培养基，待灭菌。包扎好组培盒、离心管、滤纸，将实验物品放入高压蒸汽灭菌锅中121℃/115℃灭菌20min。灭菌完毕，关闭高压蒸汽灭菌锅；将灭菌后的物品放进超净工作台内待用。

2⃣️倒种子培养基

开启超净工作台紫外灯，紫外照射不少于20min，照射结束，关闭紫外灯，通风不少于。将已灭菌的培养基用75%乙醇消毒后放到超净工作台中，提前将已灭菌的组培盒放入超净工作台中摆开晾干，在超净工作台中将已灭菌的种子培养基倒入组培盒中，静置冷凝待用。

3⃣️种子消毒

取所需数量种子放在离心管中（种子量不得超过离心管体积的1/10）加入75% 乙醇消毒，无菌水冲洗，再使用1.5% NaClO消毒10 min，轻轻摇晃，保持种子被NaClO浸泡，之后用无菌水冲洗和浸泡。4-8 h后将种子置于放有灭菌滤纸的培养皿上晾干水分，之后接种于种子培养基上。 将接种后的种子培养基放置于恒温培养箱暗培养一定时间后见光培养。

4⃣️准备外植体

接种后7至8天观察子叶角度和真叶长势，待子叶完全舒展开，第一真叶微露时切取子叶。切去1/2叶片尖端，留取剩余1/2部分并一分为二置于预培养基中，恒温条件下暗培养2 d，待后续使用。