辣椒遗传转化(三):侵染与共培养

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接前篇辣椒遗传转化(二),本篇为农杆菌的侵染与共培养,欢迎参考~

 

1. 菌液离心

在超净工作台中将达到标准的菌液,分装进50mL离心管中,离心,离心前注意配平。第一次离心后于超净工作台中倒掉上清液,加入侵染液调OD值至标准水平。

2. 菌液侵染

将预培养的外植体用镊子轻轻夹入离心管中,菌液没过外植体,待全部加入后开始计时,期间暗处理。

3. 晾干外植体

侵染15-25min后,将外植体用镊子挑出,放进盛有滤纸的一次性培养皿上,盖上盖子一定时间后外植体表面水分被吸干(依据外植体状态适当延长时间)。

4. 共培养

待菌液吸干后,将外植体整齐的摆放在共培养基上,培养基皿盖边缘记录当天日期、品种、菌编号等其他需要记录的条件。